Inscripciones abiertas del 1 al 10 de junio.
Para estudiantes de: Licenciatura en Biotecnología y Bioquímica.
Título: Construcción de reporteros fluorescentes para caracterizar la vía de señalización WSP que controla el cambio de estilo de vida en bacterias.
Tema de la actividad:
WSP es un sistema quimiosensorial homólogo al de quimiotaxis que, en lugar de controlar la rotación flagelar, regula la formación de biofilms en varias bacterias. Los biofilms son comunidades estructuradas de microorganismos inmersos en una matriz extracelular que crecen adheridos a una superficie o entre sí y les permiten a las bacterias sobrevivir frente a condiciones adversas. La vía WSP, descripta por primera vez en bacterias del género Pseudomonas, consiste en un grupo de proteínas que inician una cascada de señalización cuando las células entran en contacto con una superficie y conducen al aumento de los niveles de c-di-GMP, lo cual a su vez dispara cambios en la expresión génica que permiten la adhesión o fijación a la superficie y el desarrollo de biofilms.
En el grupo de investigación donde se encuadra el presente proyecto se ha aislado e identificado una bacteria autóctona del Mar Argentino, Halomonas titanicae KHS3 (Ht KHS3), que cuenta con un grupo de genes similares a los del sistema de señalización WSP presente en Pseudomonas. Hasta el momento, se ha demostrado que la sobreactivación de la vía tipo WSP en Ht KHS3 causa una reducción en la motilidad e incrementa el desarrollo de biofilms. Se ha identificado el receptor de dicha vía (Htc10), responsable de iniciar la cascada de señalización, y se han encontrado ligandos específicos. No obstante, hasta el momento no hay información respecto a la localización y dinámica de los complejos de señalización similares a WSP en Halomonas y no se ha explorado o caracterizado su funcionamiento. Es por esto que el presente proyecto propone construir fusiones fluorescentes de proteínas de la vía de señalización WSP de Ht KHS3 con el fin de caracterizar la disposición celular de sus componentes y contribuir a ampliar la comprensión del principal sistema quimiosensorial que permite que las bacterias se adhieran, colonicen superficies y sobrevivan frente a condiciones hostiles.
Directora: Anabel Soldano.
Asistente: Claudia Studdert.
Actividades:
Construir un sistema reportero utilizando proteínas de la vía WSP (diguanilato ciclasa Dgc, receptor Htc10 o metiltransferasa CheR2) fusionadas a la proteína fluorescente verde (Dcg-Gfp, Htc10-Gfp, CheR2-Gfp) y expresadas a partir de un plásmido bajo el control de un promotor inducible por IPTG. Utilizar el sistema reportero para estudiar, mediante microscopía de fluorescencia, la localización celular de la vía de señalización tipo WSP en Ht KHS3.
Emplear el sistema reportero en distintas cepas mutantes de la vía WSP para caracterizar su distribución celular cuando la vía de señalización se encuentra encendida o apagada. Utilizar el sistema reportero para elucidar la función de las proteínas de acoplamiento CheW presentes en el sistema tipo WSP de Ht KHS3.
Requisitos: Estudiantes de la carrera de Lic. en Biotecnología y Bioquímica que estén cursando tercer (bloque 3.1 completo), cuarto y quinto año de la carrera.
Lugar donde se llevará a cabo: Laboratorio de Microbiología Molecular (LMM), IAL, CONICET.
Duración de la actividad: 12 meses.
Documentación solicitada:
*Historia académica (incluyendo aplazos).
*Curriculum vitae.
Inscripciones abiertas del 1 al 10 de junio.
Fecha y lugar de la entrevista: lunes 12 de junio a las 13.30 h en la sala de seminarios Instituto de Agrobiotecnología del Litoral IAL-CCT.
Contacto y correo electrónico institucional para el envío de la documentación o dudas que surjan: asoldano@santafe-conicet.gov.ar